Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
26
Badaniafizykochemicznewpreformulacjileku
MetodaHPLC
Drugąpowszechniestosowanąmetodąnależącądowysokowydajnychtechnikwyzna-
czanialogPjestmetodaopartanatechnicechromatograficznejwukładzieodwróco-
nychfaz(Reversed-PhaseHighPerformanceLiquidChromatography–RP-HPLC),
wktórejfazastacjonarnazawierapodstawnikin-alkiloweodługościłańcuchanp.C8,
C18,związanechemiczniezkrzemionką,natomiastfaząruchomąjestpolarnyroz-
puszczalnik,najczęściejmieszaninawodyimetanolu.Badanyzwiązekwtrakcieprze-
mieszczaniasięprzezkolumnęchromatograficznąulegapodziałowipomiędzyhydro-
fobowąfazęstacjonarnąapolarnymrozpuszczalnikiem.Imbardziejjegocharakter
jestlipofilowy,tymwiększejestpowinowactwobadanegozwiązkudofazystacjonarnej
itymdłuższybędziejegoczasretencji.Inaczejmówiąc,związkihydrofiloweulegają
szybciejelucjiniżzwiązkihydrofobowe.Obecnośćmodyfikatora(metanolu)wfazie
ruchomejmożewpływaćnaczaselucjibadanegozwiązku,dlategowyznaczasiętzw.
współczynnikretencji(współczynnikpojemności)k8,wyrażonyrównaniem:
k'=
t
R
-t
t
o
o
(2.33)
gdzie:t
R
oznaczaczasretencjibadanejsubstancji,t
o
-czasmartwykolumny(np.czasprzejścia
rozpuszczalnikaprzezkolumnę).
Następnie,wyznaczającwspółczynnikiretencjidlafazruchomychoróżnejza-
wartościmetanolu,otrzymujesięwykres(ryc.2.11).
Rycina2.11.Wykreszależnościwspółczynnikaretencjiodzawartościmetanoluwfazieru-
chomej.Chromatograficznywspółczynnikpodziałulogk
cięcianaosirzędnych.
logk’
0%
logkw
w
jestwyznaczanywpunkcieprze-
Φ%metanolu
