Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
SekcjaB–Podstawyelektrofizjologii
B4BIOLOGIAMOLEKULARNA
KANAŁÓWSODOWYCH
IPOTASOWYCH
Hasła
Patchclamping
Budowa
napięciowo-
zależnychkanałów
sodowych
Budowa
napięciowo-
zależnychkanałów
potasowych
Metodapatchclampingpozwalanapomiarprąduprzepływającego
przezpojedynczykanałjonowy.Polegaonanawyizolowaniu
miniaturowegofragmentubłonykomórkowej(ułatka”),
znajdującegosiępodczubkiemmikroelektrodyrejestrującej.Jeśli
elektrodaprzyczepionajestdonieuszkodzonejbłonykomórkowej,
tobadanyfragmentbłonypozostajepołączonyzresztąkomórki,
copozwalanarejestracjęprądówprzepływającychprzez
pojedynczekanały.Rozerwanietegofragmentubłonyumożliwia
rejestracjęprądówmakroskopowych,przepływającychpoprzez
błonękomórkinacałejjejpowierzchni.uŁatkę”możnarównież
wyrwaćzbłonykomórkiirejestrowaćaktywnośćznajdującychsię
wniejpojedynczychkanałówjonowychwdwóchkonfiguracjach.
Stosującmetodęuzewnątrz–nazewnątrz”,badasięefekty
oddziaływanialigandówkanałówjonowych,podawanychdopłynu
inkubacyjnego.Metodauwewnątrz–nazewnątrz”umożliwia
badanieroliukładówwtórnychprzekaźnikówwmodulowaniu
aktywnościkanałów.
ZastosowaniemetodklonowaniaisekwencjonowaniaDNA
kodującegocząsteczkinapięciowozależnychkanałówsodowych
(VDSC)umożliwiłozbadaniesekwencjiaminokwasowejtych
dużychglikoproteintransbłonowych.Natejpodstawiemożna
wnioskowaćoichstrukturzedrugorzędowej.Kanałyteskładająsię
zczterechhomologicznychdomen,zktórychkażdazawierasześć
segmentówobudowiea-helikalnej(S1–S6),przechodzącychprzez
błonękomórkową.DodatnionaładowanesegmentyS4uczestniczą
waktywacjikanałów.Każdadomena,wobszarzemiędzy
segmentamiS5iS6,mapętlęH5,tworzącąścianęotworukanału
jonowego.Trzeciapętlacytoplazmatyczna,łączącadomeny3i4,
jestniezbędnadowystępowaniazjawiskainaktywacjikanału.
Natrzeciorzędowąstrukturęcząsteczkiskładająsięczterydomeny
skupionewokółotworukanałujonowego.
Budowadziałającegozopóźnieniem,odkomórkowegokanału
prostującegozaangażowanegowgenerowaniepotencjału
czynnościowego,atakżeinnychpokrewnychkanałówpotasowych,
jesthomologicznazbudowąpojedynczejdomenykanałusodowego.
Funkcjonalnekanałypotasowesąnajprawdopodobniej
tetramerycznymihomo-oligomerami.Inaktywacja(jeżeliwystępuje)
zachodzinazasadziemechanizmuukuliiłańcucha”.
WcząsteczkachkanałówpotasowychmuszkiowocowejDrosophila
