Treść książki
Przejdź do opcji czytnikaPrzejdź do nawigacjiPrzejdź do informacjiPrzejdź do stopki
26
C–MIKROBIOLOGIA
jestczasochłonneikosztowne,wzwiązkuzczymmożnawówczaswykorzystać
podłożezłożone.
Podłożazłożonemającharakterzdefiniowanywtymsensie,żedoroztworudodawane
sąznaneilościjonówbuforowych,jakiokreśloneilościekstraktówzroślin,zwierząt
czydrożdży.Popularnepodłożezłożone,bulionLuriaBertani,zawiera5gNaClnalitr,
zaśwęgiel,energia,pierwiastkiśladoweiinneczynnikiwzrostudostarczanesąw5g
ekstraktudrożdżowegonalitri10gtryptonunalitr
.Tryptontokazeina(białkomleka)
strawionaenzymamitrzustkowymi,stąddokładnyjegoskład,rozumianyjakostężenie
moloweaminokwasów,krótkichpeptydówitd.,jestnieznanyiróżnisięwzależności
odproducenta.Nieznanyjesttakżeskładekstraktudrożdżowego,czylihydrolizatu
drożdżypiekarniczych(Saccharomycescerevisiae).Patogennebakteriewywołujące
bakteremięhodujesięczęstonapodłożuzłożonym,zawierającymkrewwcałości
lubkrewpoczęściowejhydrolizie,któradostarczaniezbędnychczynnikówwzrostu,
alerównieżmożebyćwskaźnikiemobecnościorganizmówhemolitycznych,które
wytwarzająkolisteprzejaśnieniawokółkoloniinaczerwonympodłożuzkrwią.
Podłożapłynnemożnaumieścićwrozmaitychpojemnikach,adekwatnychdowymagań
tlenowychhodowanegoorganizmu.Beztlenowcefakultatywneibeztlenowcemożna
hodowaćwodpowiednichbutelkach,którychzawartośćjestłagodniewytrząsana
wcelujejwymieszania,podczasgdywprzypadkutlenowców,najczęściejwyko-
rzystywanychwbadaniach,prowadzisięzregułyhodowleokresowe(rozdziałD2)
wkolbachErlenmeyera.Kolbytemająstożkowykształt,aichobjętośćwynosiod5ml
do5l.Wypełniasięjedo10%objętości,takbypodłożepłynnemiałowystarczającą
powierzchniędlatransferutlenudohodowli(rozdziałD2).Inokulacjapodłożypłyn-
nychistałych,jakiprzenoszeniehodowlizjednegopojemnikadodrugiegobezprzedo-
staniasiędonichorganizmówzanieczyszczającychtotzw.technikaaseptyczna.
Przezostatnie100latpodłożahodowlanedopracowywanozarównopodwzględem
składu,jakiużyteczności.Składpodłożyselekcyjnychiróżnicującychumożliwiawzrost
tylkojednegorodzajulubgrupyorganizmów.Dlaprzykładupodłożeminimalnezawie-
rającemetanol,pełniącyrolęźródławęglaienergii,dopuszczawyłączniewzrostmety-
lotrofów,organizmówzdolnychdometabolizmuzredukowanychzwiązkówC1.Podłoże
możnaudoskonalić,takbymiałocharakterdiagnostyczny.ZkoleistałepodłożeBairda
Parkeraumożliwiawzrostzaledwiekilkurodzajóworganizmów,wtymMicrococcus
iStaphylococcus,przyczymjedyniewwynikuwzrostuStaphyloccusaureuspowstająsiwo-
-czarneświecącekolonieobiałychbrzegachioddzieloneodsiebiestrefą2-5mm.Ten
kształtkoloniiprzypominającejżółtkojestpierwsząwskazówkąobecnościpotencjalnych
patogenów,zanimjeszczeprzeprowadzisiębardziejszczegółoweanalizy.
Większośćpodłożystosowanychwmikrobiologiinadajesiędobadaniatlenowców,
adohodowlibeztlenowców,wszczególnościtych,dlaktórychtlenjestszkodliwy
(niektóregatunkinależącedorodzajuClostridiumiprzedstawicielearcheonów),
wymaganesąspecjalnewarunki.Całkowitaeliminacjatlenujesttrudnadoosiągnięcia,
alemożliwadziękitechnikomopracowanymprzezHungate’a.
